兔神經(jīng)生長因子ELISA試劑盒實驗操作步驟

性狀：盒裝液體

貯藏條件：2-8℃低溫保存

有效期：6個月

注意要點：請仔細閱讀產(chǎn)品的詳細使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結果。

用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。

特異性：同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。

適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床

標本：血清、、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

運輸方面：現(xiàn)貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨

ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。

服務承諾：工作時間內(nèi)免費技術咨詢和指導，提供來樣檢測及免費代測服務，保證實驗結果的有效性。

研究領域：炎癥研究、生物學、研究、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。

免費代測，從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程提供完整的技術指導。

 1.  血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.  血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
 

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