猴elisa檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢。
猴elisa檢測試劑盒的特點:
1、準確度:通過添加回收實驗進行評價;
2、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性;
3、精密度:ELISA試劑一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍;
4、經濟性:試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產或技術進步降低成本,而市場價格比較合理;
5、簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前提下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結果判斷簡單明了,定量試驗結果計算也應簡單;
6、特異性:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應,使測定結果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
猴elisa檢測試劑盒的檢測目的:
用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
操作步驟:
1、標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
2、加樣:分別設空白孔、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻;
3、加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外;
4、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘;
5、配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用;
6、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干;
7、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘;
8、終止:每孔加終止液50μl,終止反應;
9、測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。